避暗穿梭

时间:2020-12-02浏览次数:1885

本实验简单易行,反应箱越多,同时训练的动物越多。以潜伏期为指标,动物的差异性比较小。避暗视频分析系统对记忆过程特别是记忆再现有较高的敏感度。

主动回避与被动回避

回避实验是利用动物的好暗避光(明暗穿梭)、对厌恶刺激(如足电击)的恐惧和记忆而建立起来的。所以对实验者(而不是对动物)而言,回避实验在技术上与暗示关联条件恐惧相类似。所用的刺激为温和的足电击,发生的反应是动物逃避曾经受到电击刺激的地方。

根据动物的逃避方式分为主动回避和被动回避(active and passive avoidance)。前者要求动物主动从有厌恶刺激的箱中逃离;后者则要求动物遏制自己而不进入有厌恶刺激的箱。根据所用 仪器 设备的不同又可分为穿梭回避、跳台回避、Y-形迷宫回避。这里主要介绍前两种回避。

 实验设备

(一)穿梭回避实验设备 包括穿梭箱、刺激控制器和计算机。这里介绍美国Med Associates公司生产的ENV-010MC穿梭箱。它包括左右两个同等大小(20.3cm*15.9cm*21.3cm)的隔室(compartment)。

其中一隔室用一黑色布套包裹,形成暗箱(主动回避可不用暗箱)。两隔室之间由一个拱形门(8.9cm*11.4cm)相联,门可由实验者根据实验需要关上或打开。隔室地板为不锈钢栅栏(直径:大鼠4.8mm,小鼠3.175mm)。

暗箱一侧的栅栏地板与刺激器相联,并可给予电击;明箱一侧则不与刺激器相联,故没有电流通过。

(二) 跳台回避实验装置 将上述穿梭箱的中门移去,代之以一个平台(可随Med Associates穿梭箱配套),即可改装成跳台回避实验装置。这里介绍美国另外一个 仪器 公司Coulboum仪器公司的跳台回避装置。

它包括一个15cm*25cm*10cm的透明有机玻璃跳台箱、一个隔音外箱(48cm*62cm*24cm)和一台脉冲电刺激器组成。跳台箱底部的栅栏与刺激器相联,中央固定一个3.5cm*3.5cm*2.5cm的木制平台。实验时,将跳台箱放入隔音箱内,以防外界干扰。

实验方法

(一)小鼠穿梭被动回避实验(mouse step-through passive avoidance)

1.单次电击刺激训练

(1)将小鼠放入明箱,10s后,将明暗箱之间的门打开。多数品系的小鼠有很强的探究行为,喜暗恶光。因此,小鼠会很快进入暗箱。

(2)小鼠(四肢)完全进入暗箱后,立即将中门关上,并给予一次电击。电击强度为能引起小鼠退缩和发声的最小电流。根据小鼠品系不同,电流范围为0.2~0.8mA(100V,50~60Hz AC),持续1~2s。

(3)让小鼠在暗箱内停留10s(以使让动物形成箱与电击之间的关联),将小鼠放回笼内。清洁操作箱。进行下一只动物的训练。

2.记忆保持测试(retention test)

电刺激训练24h后,将小鼠放回明箱,中门打开,但不给电击。

指标参数:

观察时间、穿梭次数、潜伏期、明箱活动时间、明箱活动时间百分比、暗想活动时间、暗箱活动时间百分比、总路程、明箱活动路程、暗箱活动路程。

晶莱生物服务流程


晶莱生物实验服务项目

动物实验细胞生物学病理实验
消化系统模型细胞培养病理染色
胃酸分泌模型普通细胞株HE染色
脓毒症模型细胞缺氧培养油红O染色
胃溃疡模型细胞培养+支架番红固绿染色
胰腺炎模型干细胞培养Masson染色
肝纤维化模型原代细胞分离/提取/培养天狼猩红染色
DIO肥胖模型细胞转染/病毒感染PAS糖原染色
胆结石模型Trans well共培养阿利新蓝染色
结肠炎(UC)模型细胞增殖甲苯胺蓝染色
脂肪肝模型细胞计数尼氏染色
急性肝损伤模型生长曲线测定LFB髓鞘染色
免疫、代谢系统疾病模型存活曲线测定普鲁士蓝染色
骨质疏松模型ccK-8增殖检测VG染色
糖尿病模型MTT增殖检测EVG染色
高尿酸血症模型CFSE检测增殖-流式检测VonKossa染色
呼吸系统模型BrDU检测-免疫荧光法刚果红染色
肺纤维化模型细胞凋亡苏丹黑B染色
慢性肺阻塞模型Annexin V/PI流式检测细胞凋亡Trap染色
急性肺损伤模型WB检测凋亡相关蛋白抗酸染色
哮喘模型透射电镜观察凋亡小体革兰氏染色
肺栓塞模型Tunel染色(POD法,DAB显色)AB-PAS染色
支气管炎模型Tunel(荧光法,含试剂盒)亚甲基蓝染色
泌尿生殖系统模型DNA ladder法苯胺蓝染色
慢性肾衰模型细胞周期荧光 DAPI染色
急性肾衰模型细胞显微计数普鲁士蓝染色
肾间质纤维化模型PI染色间苯二酚碱性品红染色
肾结石模型BrdU渗入法银染
肾炎模型免疫荧光染色黑色素染色
子宫内膜异位症模型PI流式检测细胞周期镀银染色
心血管系统模型细胞运动PASM 六胺银染色
冠心病模型Transwell检测细胞迁移VG染色
心肌梗死模型Transwell检测细胞侵袭富尔根染色
心脏骤停模型细胞划痕亚甲基蓝染色
慢性心力衰竭模型细胞克隆碘-碘化钾染色
动脉粥样硬化模型集落形成法/稀释铺板方法Goldner三色法染色
白血病模型软琼脂克隆法PAS-萘酚磺S染色
高血压模型毛细管克隆法改良苯酚品红染色
神经系统模型体外实验血管生成网状纤维染色
脑卒中模型磁珠分选细胞β-半乳糖苷酶染色
栓塞性脑梗死模型流式分选细胞镀银染色
脑出血模型开机费movat五色染色
脑损伤模型单色维多利亚蓝染色
脊髓损伤模型双色免疫组化
帕金森模型CBA多细胞因子流式检测免疫组化预式
老年痴呆模型组织/血液细胞制备免疫组化正式
应激模型组织单细胞制备免疫荧光(石蜡-单标)
骨骼疾病模型中性粒细胞提取免疫荧光(石蜡-双标)
骨折模型其他样本细胞制备(如血液等)免疫荧光(石蜡-三标)
骨缺损模型外周血PBMC分离免疫荧光(冰冻-单标)
风湿免疫性关节炎模型线粒体组学免疫荧光(冰冻-双标)
骨关节炎模型线粒体膜电位检测-流式法制片前处理
五官疾病模型线粒体膜电位检测-免疫荧光法石蜡组织包埋
眼科疾病模型线粒体ROS生物含量检测--流式特殊包埋(细胞、材料、眼球等)
鼻腔疾病模型线粒体ROS生物含量检测--免疫荧光软化(肝硬化、皮肤结痂、植物等)
皮肤疾病模型线粒体通透性转换孔(mPTP)骨组织脱钙(小)
皮肤损伤模型溶酶体免疫荧光法骨组织脱钙(大)
肿瘤疾病模型线粒体+溶酶体共定位骨组织EDTA脱钙(小)
原位瘤模型内质网骨组织EDTA脱钙(大)
转移瘤模型线粒体钙瞬时变化检测-流式石蜡白片
皮下植瘤模型ATP检测细胞爬片

ADP检测

AMP检测



流式DNA/RNA半定量检测基因编辑工具
组织细胞悬液处理pcr检测mRNA合成(3保1)片段/质粒/引物合成
细胞处理microRNA检测质粒载体构建
血液标本处理LncRNA表达量的检测过表达腺病毒载体构建包装
细胞刺激培养CirRNA表达量的检测shRNA腺病毒载体构建包装
单色检测凝胶电泳过表达慢病毒载体构建包装
双色检测基因合成shRNA慢病毒载体构建包装
Annexin V/PI凋亡<300过表达腺相关病毒载体构建包装
细胞周期300-1,500shRNA腺病毒载体构建包装

1500 - 5000稳转细胞株

>5000

特殊序列



ELISAWBqPCR
组织匀浆处理蛋白提取及定量一RNA抽提
ELISA(不含试剂盒)48T/kitWB检测一(10孔膜/指标)mRNA引物设计及合成
ELISA(不含试剂盒)96T/kit灰度值分析及作图一(10孔膜/指标)miRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)48T/kit蛋白提取及定量二LncRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)96T/kitWB检测二(10孔膜/指标)CircRNA引物设计及合成

灰度值分析及作图二(10孔膜/指标)mRNA RT-qPCR


miRNA RT-qPCR


LncRNA RT-qPCR


CircRNA RT-qPCR



收费标准/服务周期/提供结果:
欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
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