LFB髓鞘染色

LFB髓鞘染色简介：
劳克坚牢蓝(LFB)属于铜－酞箐染料，在酒精溶液中具有与髓鞘磷脂结合的染色特性。应用LFB髓鞘染色可以很好地显示出神经组织的髓鞘结构。

LFB髓鞘染色实验意义：
LFB染色观察染色阳性纤维的深浅和多少，还可用来定量分析脱髓鞘病变及髓鞘再生等有关髓鞘改变情况。

实验步骤：
（1）石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。
（2）染色：切片置于0.1% LFB染液60℃孵育过夜，自来水冲洗。
（3）分化：切片放入70%乙醇中（无固定时间）；切片浸入0.05% 碳酸锂中，镜下控制分色时间至分色完全（可见灰质部分颜色变淡）；如分化不好这两步交替进行几次至镜检满意，水洗。
（4）伊红复染：0.1%伊红复染1min，水洗。
（5）封片：电吹风吹干或烘箱吹干；二甲苯透明数分钟，中性树胶封片。
（6）显微镜镜检，图像采集分析。

实验结果：
经髓鞘呈蓝色；其他成分呈红色。

实验技巧：
（1）切片若为石蜡切片，要在二甲苯中先脱蜡，再至无水乙醇。
（2）0.05%碳酸锂水溶液分色应该在显微镜下进行，至背景呈灰色为止。70%酒精再次分色时，至背景无色为止。
（3） LFB染色完后，可用焦油紫溶液或苏木素－伊红复染，这样能更好地显示出细胞的形态。
（4） 复染之后要入正丁醇漂洗脱水，这样染色效果更佳。
（5） 溶液配制：劳克坚牢蓝1g，95%酒精100ml，10%冰.醋.酸0.5ml。混匀后过滤，室温保存。

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LFB髓鞘染色样片参考：




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