神经元尼氏染色实验服务

实验技术简介：
Franna Nissl (1860-1919) 1892年创立了Nissl染色法，以发现Nissl小体和Nissl变性而闻名。常用的碱性染料有Cresyl violet (焦油紫，甲.酚紫，克紫）；thionine (硫荲)；tolridine blue (甲苯.胺蓝)等。
尼氏体为嗜碱性物质，又称嗜染质，光镜 下呈斑块状或细粒状散在均匀分布。在一些大型的运动神经元，尼氏体大而多，宛如虎皮花纹，又称“虎斑”。电镜下，尼氏体由大量平行排列的粗面内质网和其间 的游离核糖体组成。尼氏体是神经元胞体细胞质的特征性结构之一，神经元胞质另外一特征性结构为神经原纤维。

实验技术原理：
正常的神经细胞都含有一定数量的尼氏体，它们主要分布于神经细胞 的浆中，形状有大有小，如三角形，有的为椭圆形。这些物质能被大部分的蓝色染料所染色，这些染料如焦油坚牢紫（Cresyl fast violet）亚 甲蓝（methylene blue）甲苯.胺蓝（toluidine blue）硫董（thionin）等钭其染为蓝色。但是，当神经细胞受伤后，胞质内 的尼氏体更可发生变化，严重的可消失。

实验操作流程：
1、切片脱蜡至水  
2、用焦油坚牢紫水溶液浸染20-30分钟  
3、水洗  
4、用95%酒精分化  
5、无.水.酒.精脱水，二甲苯透明，中性树胶  

实验结果：
神经细胞单位：紫-蓝色  细胞核：紫-蓝色  尼氏体：紫-深蓝色

实验注意事项：

客户提供：
1、组织样品：新鲜组织放入液氮或-80度保存，组织不少于100mg；
2、培养细胞：通过细胞计数取不少于2×10⁶个细胞于EP管，加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，混匀后保存于冰箱（-80℃，避免反复冻融）；
3、血液细胞标本：以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，保存（-80℃可长期保存，避免反复冻融）；
4、血清或细胞培养液标本：离心去掉杂质后取上清入EP管，保存（4℃可保存15-20天，-80℃可长期保存，避免反复冻融）；
5、石蜡切片，冰冻切片以及细胞爬片，涂片等。
6、样本运输：可选择以下任何一种方式寄送标本
组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后，加冰袋寄送；
细胞样本也可直接寄送培养瓶（密封保证不污染、培养液不漏出）；
血清或上清液直接加冰袋寄送（送视路程远近2-3天可到达）。

交付标准：
1、图片；
2、完整项目报告（材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果）。

其他：
1、应用酒精分化切片，要迅速，防止过度分化，将切片上的颜色全部脱掉。

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