中性粒细胞提取

一、实验所需材料：

  1、中性粒细胞分离液（histopaque）

   2、全血

   3、Hanks液

   4、离心管若干

   5、离心机

   6、移液管，移液抢

二、实验步骤

  1. 将所有试剂放至室温。

 2、用离心管收集全血1-2ml       

 3、加等体积的Hanks液至全血中组成     

  4、加2ml中性粒细胞分离液至装至离心管中。

  5、将全血和Hanks液加入分离液中

 6、4℃，900r/min离心8-10min血液此时应该分为6层：血浆、单核细胞层、分离液、中性粒细胞、其余的分离液、红细胞沉淀层。如果分层不是很明显，会导致分离的细胞不纯，则需要重复分离。

  7、用吸管小心地移去上面的三层（血浆、单核细胞和分离液）

  8、小心地吸取中性粒细胞层和其下面的分离液层，转移至一个干净的离心管中。

 9、加Hanks液3ml，后4℃，900r/min离心8-10min，弃上清，留沉淀，重复2次。

  10、如果细胞用来提RNA，可加Trizol 1ml保存。

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