【五分钟讲实验】急性胰腺炎动物模型分析详解！

急性胰腺炎是常见的消化系统急症。重症急性胰腺炎患者治疗难度大，预后较差。自20世纪80年代以来，我国学者在该领域进行了大量基础和临床研究，在发病机制、肠屏障功能、治疗药物开发、多学科协作等方面取得一系列重要成果，极大地提升了我国急性胰腺炎的诊疗水平。

2005-2023年胰腺炎研究项目数统计

1. 病因

急性胰腺炎是由于胆道系统疾病（胆管炎、结石、寄生虫、水肿）、酗酒、暴饮暴食、术后损伤、感染、高脂血症及高钙血症等因素引起的胰酶消化胰腺及其周围组织的炎症，最常见的病因是胆道梗阻性疾病。

2. 鉴别

根据临床表现选择检查方法，主要包括：

① 血液检查（淀粉酶、脂肪酶、血生化、血常规、超敏C反应蛋白等）；

② 影像学检查（胸腹部X线、CT、腹部超声等）；

③ 病理检查（胰腺穿刺取活组织病理切片检查）；

④ 胰腺内分泌功能检测（血糖及胰岛素、胰多肽、血清胆囊收缩素）。

3. 发病机制

以多种病因引起胰酶激活，胰腺自我消化，继以胰腺及周围组织局部炎症反应，胰腺水肿、出血及坏死。

1.  实验材料

① 动物：8周龄C57BL/6小鼠，雌性。

② 试剂：牛磺胆酸钠。

③ 仪器：微量注射泵。

④ 耗材：一次性注射器、EP管、毛细玻璃管。

2. 操作方法

① 动物造模前夜禁食不禁水；

② 异氟烷麻醉，正中切口开腹，找到与十二指肠连接的胰胆管，丝线穿过十二指肠，轻拉出十二指肠，顺胆胰管找到十二指肠开口，使用穿刺针或者0.5mm注射器针头在近十二指肠开口端逆行刺入胰胆管，拔出针头插入微电极，动脉夹夹住肝门下胆管汇合处胆总管，以10ul/min速度向胰管内匀速注射2-3%牛磺胆酸钠溶液，注射剂量30-50ul，注射结束后停针5分钟，确保牛磺胆酸钠溶液弥散至整个胰腺，大体检查胰腺的变化； 

③ 缝合皮肤，观察并记录小鼠一般状态； 

④ 术后12-24h处死动物，收集血清、胰腺组织。

3. 模型评价

① 胰腺大体观察

② 血液指标检测

③ 病理检测

1. 模型特点

牛磺胆酸钠输注12h后，血清淀粉酶水平明显上升，腺泡细胞坏死，持续到24h，损伤会进一步加重，胰头大面积坏死，胰尾出现水肿；

2. 注意事项

① 用血管夹阻塞总胆管，以避免牛磺胆酸钠回流到肝脏，这一步非常关键； 

② 针头不能插入过深，避免溢出到腺实质； 

③ 不能注射入空气，以防止胆总管阻塞； 

④ 用微量注射泵，保证注射速度、时间、体积恒定。