肺炎模型

鲍曼不动杆菌（ Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ ） 是需氧的不发酵糖革兰阴性杆菌， 属条件致病菌， 主要引起 医 院 获 得 性 肺 炎， 尤 其 是 呼 吸 机 相 关 性 肺 炎（ ＶＡＰ ）， 亦可引 起血流感染、 脑膜炎、 腹膜炎、 伤口感染等多种感染  。

小 鼠 气 管 插 管 操 作 步 骤 ：

       建立在耳窥镜直视下 小鼠气管插管方法。 具体步骤如下： 采用 １． ２５％ ２ ， ２ ， ２ 三溴乙醇（ ２５ ｍｇ ／ｋｇ）腹腔注射， 待小鼠麻醉后仰卧位固定小鼠于啮齿动物工作台 上， 采用门 齿环一端钩住小鼠门齿， 另 一端固定于操作台， 缓慢倾斜工作台至 ４５° ， 操作者右手持直头镊牵拉小鼠舌头， 左手持带电池手柄的耳窥镜， 耳窥镜尖端深入小鼠舌上， 透

过耳窥镜的放大镜， 操作者可观察到小鼠的声门 随呼吸而开启 、闭合。 在小鼠声门开启 的瞬间， 操作者迅速将已安装气管插管的气管内 导管插入气道， 并退出导管。 将喉镜紧贴气管插管口 ， 若喉镜表面有雾气形成表明插管成功。

注射菌液 ：

       气管插管成功后， 沿气管插管注射 １０ μ Ｌ 鲍曼不动杆菌菌液， 吹打 ３ 次， 确保菌液全部进入小鼠肺部。 小鼠在啮齿动物操作台 竖立 １ｍｉｎ 后， 缓 慢 放 平 操 作 台， 将 小 鼠 放 回 饲 养 笼 中。

肺组织细菌定量：

       待麻醉小鼠全部苏醒，颈椎脱臼 法处死小鼠， 无菌操作取出 小鼠两肺， 称重后每 ０． １ ｇ 肺加入 ０． ９ ｍＬ 生理盐水， 组织匀浆机研磨， 取 １００μ Ｌ经系列稀释后接种于 ＬＢ 培养基培养１６ ｈ 后行菌落计数， 继而计算出 每克肺组织的细菌含量。