qPCR

时间:2018-10-30浏览次数:1306

qPCR

即实时荧光定量PCR,就是在PCR的扩增过程中,通过荧光的信号,对PCR的进程进行实时的定性、定量检测,检测方式有SYBR Green染料法和Taqman探针法两种方式。

 

探针法与染料法的优缺点

1. 探针法通过探针可以增加反应收集信号的特异性,只有探针结合的片段上发生扩增才能收集到信号,能够用多重体系反应的方法,能够预测和提前进行反应条件的优化,缺点是要合成探针,成本高,周期长。

2. 染料法经济实惠,可以做溶解曲线,分析全部PCR产物的TM值,缺点就是特异性没有探针法好。

 

结果展示

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实验周期及交付标准

1. SYBR Green染料法

实验周期:1-2周

交付标准:扩增曲线、溶解曲线、Ct值、引物、实验报告(实验步骤、试剂、仪器等)


2. Taqman探针法

实验周期:1个月左右

交付标准:拷贝数(绝对定量)、扩增曲线、标准曲线(绝对定量)、样品统计分析、探针及其序列实验报告(实验步骤、试剂、仪器、原始数据等)

 

需确认的信息

1. 目的基因及种属

2. 样本种属及类型(组织、细胞、血清等)

3. 样本数量

4. 是否提供引物

5. 数据统计与分析要求


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