透射电镜

时间:2018-12-10浏览次数:2294

透射电镜

Transmission Electron Microscope, 简称TEM,透射电镜可以观察样品的内部精细结构,这些结构即亚显微结构或者超微结构。透射电镜使用的是透射电子,并收集透过样品的电子,从而提供了样品的内部结构的信息,如晶体结构、形态以及应力状态的信息。目前最先进的TEM其空间分辨率达到了pm级别。由于透射电子的要求,TEM的样品必须制备成超薄切片,通常为50-100 nm,样品制备比较繁琐,常用的方法有超薄切片法、冷冻超薄切片法、冷冻蚀刻法、冷冻断裂法等。


实验意义

1.透射电镜是表征各种样品的有力工具,它的多功能性和极高的空间分辨率使其在许多应用中非常有价值。

2.TEM能够观察样品的内部结构,同时在病理诊断中可以补充和纠正光镜诊断的疑难问题,可以提高病理诊断的准确性。


实验步骤

透射电镜生物样品的制备:①取小于1立方毫米的组织;②用2.5%戊二醛(磷酸缓冲液配制)固定2小时,0.1M的磷酸缓冲液漂洗3次×15 min;③1%锇酸固定液固定2小时,0.1M的磷酸缓冲液漂洗3次×15 min;④梯度乙醇进行脱水,4℃进行;⑤包埋:使用纯丙酮+包埋液(2:1)室温处理4小时,纯丙酮+包埋液(1:2)室温过夜,纯包埋液37℃处理3小时;⑥固化:37度烘箱过夜,45度烘箱12小时,60度烘箱24小时;⑦超薄切片机切片,厚度在50 nm左右;⑧3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色;⑨透射电镜观察,拍片。


结果展示[1]


透射电镜111.jpg


实验完成周期及交付标

1. 实验周期:一个月左右

2. 交付标准:电镜图片、病理报告、实验报告(实验步骤、试剂、仪器等)


实验需与客户确认的信息

1. 样本的种属

2. 样本类型,是组织还是细胞

3. 样本数量

4. 透射电镜分析要求、拍照要求或是参考文献


参考文献

[1] Xu T , Lu S , Zhang H . Transmission electron microscope evidence of telocytes in canine dura mater[J]. Journal of Cellular and Molecular Medicine, 2016, 20(1):5.

[2] Cizmar P , Yuana Y . Detection and Characterization of Extracellular Vesicles by Transmission and Cryo-Transmission Electron Microscopy[J]. Methods in Molecular Biology, 2017, 1660:221.

 

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