荧光定量PCR，qPCR

实验意义

荧光定量 PCR（Realtime fluorescence quantitative PCR，qPCR）也称作实时荧光定量 PCR。就是在PCR的扩增过程中，通过荧光的信号，对PCR的进程进行实时的定性、定量检测，最后通过标准曲线对初始模板进行定量分析的方法。
检测方式有SYBR Green染料法和Taqman探针法两种方式。

探针法与染料法的优缺点

1. 探针法通过探针可以增加反应收集信号的特异性，只有探针结合的片段上发生扩增才能收集到信号，能够用多重体系反应的方法，能够预测和提前进行反应条件的优化，缺点是要合成探针，成本高，周期长。

2. 染料法经济实惠，可以做溶解曲线，分析全部PCR产物的TM值，缺点就是特异性没有探针法好。

结果展示

实验周期及交付标准

1. SYBR Green染料法

实验周期：1-2周

交付标准：扩增曲线、溶解曲线、Ct值、引物、实验报告（实验步骤、试剂、仪器等）

2. Taqman探针法

实验周期：1个月左右

交付标准：拷贝数（绝对定量）、扩增曲线、标准曲线（绝对定量）、样品统计分析、探针及其序列实验报告（实验步骤、试剂、仪器、原始数据等）

需确认的信息

1. 目的基因及种属

2. 样本种属及类型（组织、细胞、血清等）

3. 样本数量

4. 是否提供引物

5. 数据统计与分析要求

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