mPTP

时间:2018-12-19浏览次数:932

mPTP:是线粒体内外膜之间的一组蛋白复合体,是由外膜的电压依赖的阴离子通道(VDAC)、内膜的腺嘌呤核苷转位蛋白(ANT)以及亲环素D等组成。线粒体通透性转换孔(mPTP)在细胞的生存、凋亡中扮演着重要角色,它涉及缺血/再灌注、肿瘤、衰老、神经变性等多个领域。


检测手段

线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测


实验步骤

纯化线粒体样品,样本的一系列处理:

 

选择下列方式之一进行操作:

1. 使用(共聚焦)荧光显微镜观察(定性检测):

①移取10微升上述悬液到载波片上,盖上盖玻片

②激发波长488nm,散发波长505nm――

绿色荧光减弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增强

 

2.  或使用荧光分光光度仪或荧光酶标仪检测(定量检测):

①移取100微升上述悬液到100微升比色杯或黑色96孔板

②即刻放进荧光分光光度仪或荧光酶标仪:激发波长488nm,散发波长505nm――

RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增强

 

 荧光1.png     荧光2.png

荧光显微镜观察检测

 

实验周期及交付标准

1. 实验周期:2-3周

2. 交付标准:荧光图片、比值、实验报告(实验步骤、试剂、仪器)

 

需确认的信息

1. 样本种属及类型(组织还是细胞)

2. 样本数量

3. 是否提供探针


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