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细胞侵袭
Matrigel是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分,含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖,铺在无聚乙烯吡硌烷酮的聚碳酸酯滤膜上,能在DMEM培养基中重建形成膜结构,这种膜结构与天然基质膜结构极为相似。滤膜孔径一般为8μm,而且膜孔都被Matrigel覆盖,细胞不能自由穿过,必须分泌水解酶,并通过变形运动才能穿过这种铺有Martrigel的滤膜,这与体内情况较为相似。可通过这种模型来检测细胞的侵袭情况。
通过体外模型来检测细胞的侵袭情况,主要应用于各种细胞因子对恶性肿瘤细胞侵袭和转移的影响及一些抑制血管生成的新药研究。
细胞侵袭实验 (cell invasion assay)
实验材料
(1)Matrigel (BD 5mg/ml),-20℃保存
(2)其余材料同迁移实验
操作步骤
(1)Matrigel在4℃过夜融化;
(2)用4℃预冷的无血清培养基稀释Matrigel至终浓度1mg/ml,冰上操作;
(3)在chamber上室底部中央垂直加入100μl稀释后的Matrigel,37℃温育4-5小时使其干成胶状;
(4)后续步骤同迁移实验(1-8)。
注意事项
(1)Matrigel在过高或过低的温度均易凝固,因此操作所需枪头和离心管应提前在4℃预冷;
(2)铺胶时保证液面水平,胶的厚度均匀一致,切勿产生气泡;
(3)其他注意事项同迁移试验。
服务对象:
1、在职或专职临床研究生、博士生
● 实验室条件的不完备
● 文章设计不完善
● 临床工作繁忙
● 实验条件摸索不成熟
● 科研时间严重不足
● ……
2、地市级三级医院科室主任、主任医师、主治医师等
● 公务繁忙
● 无精力、时间查找文献
● 没有时间寻找领域内新热点
● 科研圈子氛围不够浓厚
● 需要更前沿的科研技术应用
● 晋升、晋职需要
● ……
3、繁重科研任务的临床医生
● 文章设计不完善
● 科研任务繁重忙不过来
● 临床工作繁忙,千头万绪
● 周围环境和条件的局限
● 缺少实验数据
● ……
4、有志于科研的各级医院临床医生/护士
● 奋战在病房一线
● 时间都给了病人
● 有志于科研
● 心有余而力不足
● ……
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服务流程:
1. 课题设计阶段交流
2. 相关文献查阅
3. 实验流程设计
4. 各项实验操作
5. 整理实验结果
6. 数据统计与分析处理
7. 结题
收费标准/服务周期/提供结果:
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