高空十字架

时间:2020-12-02浏览次数:1475

实验原理
啮齿类动物具有探究新环境的习性,但是又厌恶强光和开阔地。EPM就是利用啮齿类动物对新异环境的探究行为和对高悬着的开臂的恐惧形成的矛盾冲突状态,评价**的抗焦虑或致焦虑作用。EPM*初是由Montgomery在1955年的工作发展而来的。Pellow等人根据研究需要设计出了具有两个开臂和两个闭臂的十字迷宫,并将迷宫抬高借以增加动物进入开臂时的恐惧。高架十字迷宫是一个简单、快速、结果重复性好的焦虑检测模型,因此广泛应用于抗焦虑**的研究与开发。

实验装置
高架十字迷宫可以是木质结构,现在多为无味的塑料材质,颜色为黑色。50cm*10cm的两个相对开臂(open arm)和两个50cm*10*40cm的相对闭臂(closed arm),闭臂的上部是敞开的。迷宫中央有一10cm*10cm的开阔部,迷宫距离地面50cm高。迷宫上方安装录像监控器,以录制动物在迷宫中的活动情况,以供日后分析使用。

实验方法
1. 在实验前一个星期,每天抚摸实验动物1-5min,连续7天,借以消除实验动物对实验者的恐惧。
2. 将实验动物放入迷宫中央区,头朝开臂,并注意此后每只实验动物均放在同一位置。同时开启摄像监控器记录5min内实验动物开臂和闭臂的进入次数及进入各臂的时间。实验过程中实验者需距离迷宫1米的距离。
3. 记录结束后将实验动物放回饲养笼具内。同时清理迷宫,并用5%的醋酸水溶液或75%的酒精擦拭迷宫,借以消除动物气味对后继实验动物的影响。

实验数据
主要应用的实验数据:                        
1.开臂进入次数百分比= 开臂进入次数/开臂进入次数+闭臂进入次数                          
2.开臂滞留时间百分比= 开臂滞留时间/开臂滞留时间+闭臂滞留时间
此两指标作为评价焦虑的指标,通常这两个指标高度相关。如果一个**增加动物对开臂的偏爱(即增加进入开臂的次数和在开臂内滞留时间),却不改变入臂总次数和入臂总时间,也即开臂进入次数百分比和开臂滞留时间百分比升高,则认为该**具有抗焦虑的作用。相反一个**如果减少实验动物对开臂的偏爱,而入臂总次数和入臂总时间不变,则认为该**具有致焦虑的作用。

注意事项
1. 为了提高大鼠入臂总次数,避免大鼠总是躲在闭臂中,通常在测试前先将大鼠放在开阔场地(open field)中适应5min后再放入迷宫。
2. 实验前一周每天抚摸大鼠可以明显减少大鼠对实验者的恐惧感以及无关刺激对迷宫中大鼠的影响。
3. 尽管还没有证据证实在**中不同时间对于实验结果是否有明显的影响。但是结合本人实验的数据建议实验动物检测时间*好在上午9:00至下午15:00之间进行,如果有条件,且需要重复多次检测,尽量在每天同一时间段检测,以减少数据的波动。
4. 如果实验中实验动物从高架上跌落,*好将此动物剔除。现在的厂家生产的高架十字迷宫在开臂的周边加了一个小边。但这样会改变焦虑的性质和降低抗焦虑**的敏感性。
5. 高架十字迷宫具有某些表观信度,动物不愿探究迷宫开臂可能由于啮齿类动物厌恶空旷区域和迷宫抬高引起的恐惧两者共同作用的结果,目前尚不清楚这两个因素哪个在致焦虑中占优势。
6. 进入开臂的次数和在开臂停留的时间随年龄的增长而减少。因此年龄较大的大鼠抗焦虑的效果较弱,但是对于安定类**的**反应增强。
7. 高架十字迷宫*初用于雄性大鼠,但是也可用于雌性大鼠。但是所测定的行为有所不同。用雄性大鼠主要测定焦虑,而用雌性大鼠主要测定活动性。
8. 除了大鼠,高架十字迷宫还用于小鼠,也有文献报道用沙土鼠进行检测,但是存在明显品系差异。
9. 迷宫设计时对开臂的相对强光有所考虑。实验中建议高架十字迷宫光源避免直接照射在高架十字迷宫上,也需要避免光线不均匀的照射在各臂上。可在高架十字迷宫周围悬挂具有一定遮光性的布帘造成迷宫的周边环境相对一致以及弱光照环境。

晶莱生物服务流程


晶莱生物实验服务项目

动物实验细胞生物学病理实验
消化系统模型细胞培养病理染色
胃酸分泌模型普通细胞株HE染色
脓毒症模型细胞缺氧培养油红O染色
胃溃疡模型细胞培养+支架番红固绿染色
胰腺炎模型干细胞培养Masson染色
肝纤维化模型原代细胞分离/提取/培养天狼猩红染色
DIO肥胖模型细胞转染/病毒感染PAS糖原染色
胆结石模型Trans well共培养阿利新蓝染色
结肠炎(UC)模型细胞增殖甲苯胺蓝染色
脂肪肝模型细胞计数尼氏染色
急性肝损伤模型生长曲线测定LFB髓鞘染色
免疫、代谢系统疾病模型存活曲线测定普鲁士蓝染色
骨质疏松模型ccK-8增殖检测VG染色
糖尿病模型MTT增殖检测EVG染色
高尿酸血症模型CFSE检测增殖-流式检测VonKossa染色
呼吸系统模型BrDU检测-免疫荧光法刚果红染色
肺纤维化模型细胞凋亡苏丹黑B染色
慢性肺阻塞模型Annexin V/PI流式检测细胞凋亡Trap染色
急性肺损伤模型WB检测凋亡相关蛋白抗酸染色
哮喘模型透射电镜观察凋亡小体革兰氏染色
肺栓塞模型Tunel染色(POD法,DAB显色)AB-PAS染色
支气管炎模型Tunel(荧光法,含试剂盒)亚甲基蓝染色
泌尿生殖系统模型DNA ladder法苯胺蓝染色
慢性肾衰模型细胞周期荧光 DAPI染色
急性肾衰模型细胞显微计数普鲁士蓝染色
肾间质纤维化模型PI染色间苯二酚碱性品红染色
肾结石模型BrdU渗入法银染
肾炎模型免疫荧光染色黑色素染色
子宫内膜异位症模型PI流式检测细胞周期镀银染色
心血管系统模型细胞运动PASM 六胺银染色
冠心病模型Transwell检测细胞迁移VG染色
心肌梗死模型Transwell检测细胞侵袭富尔根染色
心脏骤停模型细胞划痕亚甲基蓝染色
慢性心力衰竭模型细胞克隆碘-碘化钾染色
动脉粥样硬化模型集落形成法/稀释铺板方法Goldner三色法染色
白血病模型软琼脂克隆法PAS-萘酚磺S染色
高血压模型毛细管克隆法改良苯酚品红染色
神经系统模型体外实验血管生成网状纤维染色
脑卒中模型磁珠分选细胞β-半乳糖苷酶染色
栓塞性脑梗死模型流式分选细胞镀银染色
脑出血模型开机费movat五色染色
脑损伤模型单色维多利亚蓝染色
脊髓损伤模型双色免疫组化
帕金森模型CBA多细胞因子流式检测免疫组化预式
老年痴呆模型组织/血液细胞制备免疫组化正式
应激模型组织单细胞制备免疫荧光(石蜡-单标)
骨骼疾病模型中性粒细胞提取免疫荧光(石蜡-双标)
骨折模型其他样本细胞制备(如血液等)免疫荧光(石蜡-三标)
骨缺损模型外周血PBMC分离免疫荧光(冰冻-单标)
风湿免疫性关节炎模型线粒体组学免疫荧光(冰冻-双标)
骨关节炎模型线粒体膜电位检测-流式法制片前处理
五官疾病模型线粒体膜电位检测-免疫荧光法石蜡组织包埋
眼科疾病模型线粒体ROS生物含量检测--流式特殊包埋(细胞、材料、眼球等)
鼻腔疾病模型线粒体ROS生物含量检测--免疫荧光软化(肝硬化、皮肤结痂、植物等)
皮肤疾病模型线粒体通透性转换孔(mPTP)骨组织脱钙(小)
皮肤损伤模型溶酶体免疫荧光法骨组织脱钙(大)
肿瘤疾病模型线粒体+溶酶体共定位骨组织EDTA脱钙(小)
原位瘤模型内质网骨组织EDTA脱钙(大)
转移瘤模型线粒体钙瞬时变化检测-流式石蜡白片
皮下植瘤模型ATP检测细胞爬片

ADP检测

AMP检测



流式DNA/RNA半定量检测基因编辑工具
组织细胞悬液处理pcr检测mRNA合成(3保1)片段/质粒/引物合成
细胞处理microRNA检测质粒载体构建
血液标本处理LncRNA表达量的检测过表达腺病毒载体构建包装
细胞刺激培养CirRNA表达量的检测shRNA腺病毒载体构建包装
单色检测凝胶电泳过表达慢病毒载体构建包装
双色检测基因合成shRNA慢病毒载体构建包装
Annexin V/PI凋亡<300过表达腺相关病毒载体构建包装
细胞周期300-1,500shRNA腺病毒载体构建包装

1500 - 5000稳转细胞株

>5000

特殊序列



ELISAWBqPCR
组织匀浆处理蛋白提取及定量一RNA抽提
ELISA(不含试剂盒)48T/kitWB检测一(10孔膜/指标)mRNA引物设计及合成
ELISA(不含试剂盒)96T/kit灰度值分析及作图一(10孔膜/指标)miRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)48T/kit蛋白提取及定量二LncRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)96T/kitWB检测二(10孔膜/指标)CircRNA引物设计及合成

灰度值分析及作图二(10孔膜/指标)mRNA RT-qPCR


miRNA RT-qPCR


LncRNA RT-qPCR


CircRNA RT-qPCR



收费标准/服务周期/提供结果:
欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
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