裸鼠乳腺癌原位瘤

1、人乳腺癌细胞株的选择

       目前人乳腺癌细胞建株的癌细胞较多，本人曾接触过细胞株总结如下：

       ER（+）：MCF-7（来源：乳腺腺癌），ZR-75-30（乳腺导管癌），T47D（乳腺导管癌），ZR-75（乳腺腺癌）。

       ER（-）：MDA-MB-435s（乳腺导管癌），MDA-MB-435（乳腺导管癌），SK-BR-3 （乳腺腺癌），MDA-MB-231（乳腺腺癌），MDA-MB-453（乳腺腺癌）。

       作为乳腺癌细胞移植裸鼠的选择，本人推荐：ER（+）选用MCF-7和ZR-75-30；ER（—）选用MDA-MB-435s和MDA-MB-231。这几株细胞成瘤率较高。

2、提高移植成功率

       ①将HBC细胞植入裸鼠的乳房脂肪垫（Mammary fad pat，mfp），又称原位移植（相反则称异位移植），不仅可以提高乳腺癌细胞的成瘤率而且可以增加转移的发生率。

       ②促进肿瘤细胞在裸鼠体内形成肿瘤的方法是将癌细胞和Matrigel或成纤维细胞混合后注入裸鼠体内。Matrigel是由层粘连蛋白、Ⅳ型胶原纤维、硫酸乙酰肝素和巢蛋白组成的混合物，在4℃为液体，而在37℃则聚合形成一种凝胶。

       ③裸鼠的选择

       Balb/c、 nu/nu雌性裸鼠 (SPF级)，4-6周龄，体重18-22g，预实验选用Balb/c小鼠，用于mfp的解剖。

3、材料

       常规器械：15号小圆刀、小刀柄、1ml,5ml空针、橡筋、定鼠板、钉子、止血钳、眼科剪、口罩帽子手套；

       药品准备：安氟醚、NS、酒精、脱毛剂（硫化钠）、肾上腺素；

       显微外科器械：8倍目视显微镜或16倍台式显微镜、显微手术器械（组织剪、持针器、镊子）、50ul微量注射器（检验系用）；

       小鼠解剖准备：BALB/C小鼠（清洁级）；

       饲养条件准备：鼠笼、饲料、水杯；

       脱毛剂配方：硫化硷10g、生石灰15g、40％酒精100ml。

操作注意事项：

       ①特别注意：进针后准确、缓慢注入裸鼠乳腺脂肪垫内，万不可让细胞溢出脂肪垫；

       ②注射剂量、进针深度、角度、注射器推进速度；

       ③对注射癌细胞后的裸鼠当病人认真对待，认真做好病程记录：生命体征、体重、活动度、食量、饮水量等。