慢性支气管炎动物模型

基本原理
慢性支气管炎(chronic bronchitis)是指由感染或非感染因素引起的气管、支气管黏膜及其周围组织的慢性非特异性炎性反应。慢性支气管炎的病理特点是支气管腺体增生、黏液分泌增多。临床常以咳嗽、咳痰或伴有喘息反复发作，每次持续3个月以上，连续2年以上的慢性过程为特点，严重时可并发阻塞性肺气肿，甚至肺源性心脏病。慢性支气管炎以老年人居多，病程初期一般症状比较轻微，发病季节以冬季较为多见，至春季天气转暖后症状缓解；晚期一般表现为炎性反应较前加重，且症状不分季节、常年存在。目前，慢性支气管炎已成为影响人类健康和生活质量的主要疾病之一，研究其治疗及预后具有重要的意义。慢性支气管炎的发病与吸烟、感染、气候因素(如寒冷)、理化因素(如，刺激性烟雾、粉尘、SO2等)、过敏、呼吸道局部防御及免疫功能降低、自主神经功能失调等内外界因素密切相关。

造模机制
对动物施加各种能诱发慢性支气管炎的损伤性因素，进行长期的刺激，引起气管、支气管黏膜及其周围组织的慢性炎症。诱发慢性支气管炎的方法主要有：化学药物法(二氧化.硫、氯、氨.水、脂多糖、酶、肾上.腺素能药物、胆碱能药物、促分泌素等)、细菌感染法(肺炎克雷伯杆菌、肺炎链球菌等)、被动吸烟法(生烟叶、稻草烟、混合烟等)和复合方法(如细菌加烟雾、细菌加寒冷等)。这些方法可以单独或复合使用。

造模方法
1．化学药物法
(1)使小鼠吸入含SO2(浓度为2％)的空气，每日10秒，14～18天后小鼠即出现支气管炎病变，27天后出现重度支气管炎病变，总观察时间为97天。
(2)使小鼠吸入含Cl2(浓度为0.001～0.O04mg/L)的空气，每日25～30分钟，35天后小鼠可出现慢性支气管炎病变，总观察时间为50天。
(3)用含氨.气的空气以每15～20分钟重复刺激1次，每次2～3分钟，刺激一天共8次，32天后可出现慢性支气管炎症状，总观察时间为100天。
(4)气管内注射脂多糖法：大鼠用1％戊巴bi妥钠腹腔注射麻醉，仰卧位固定于操作台，拉出舌体，暴露声门，快速将套管插入气管，将脂多糖200μg/200μl注入气管。饲养4周，制备大鼠慢性支气管炎模型。

2．细菌感染法
(1)使用鸡胚液培育流感病毒，选取培育48小时的鸡胚液，单位为1：320；流感杆菌为18～24小时的培养物，菌液浓度为7×100000000ml，小鼠在乙mi麻醉状态下，将感染材料滴鼻(0.03ml/只)，于3～6天出现气管上皮轻度坏死，35天后表现为典型的慢性支气管炎症状。
(2)用流感杆菌9亿/ml、甲型链球菌6亿/ ml、卡他性炎性菌9亿/ml、肺炎双球菌6亿/ml、以4：3：2：1混合菌液在麻醉下对大鼠进行滴鼻0.1ml，每周1次，6周有形成慢性支气管炎的趋势，但程度很轻。
(3)将豚鼠置于7～8℃环境中1小时，隔天1次，45天后改为每周2次，同时加细菌(8种)混合菌液滴鼻0.2ml，150天可形成亚急性乃至慢性支气管炎病变。

3．被动吸烟法
(1)烟雾致大鼠慢性支气管炎法：将大鼠置于27立方米烟室内，用混合烟150～200mg/立方米(200g锯末、15～20g烟叶、6～7g辣椒及1g硫黄混合，20～30分钟内烧化，颗粒在0.5～1μm以上)吸入，每周6次，44天即可形成慢性支气管炎病变。
(2)用香烟1支半，在21L容器内燃化共10分钟，换气5分钟后，再用1支香烟烧化，重熏10分钟。将豚鼠置于这种烟雾环境中，每天1次，每周6次，同时置于7～8℃环境中1小时，隔天1次，45天后改为每周2次，28～35天可出现慢性支气管炎病变，6周后病变保持并逐渐加重。

模型特点
吸入SO2所致的慢性支气管炎动物模型具有如下特点：①小鼠出现刺激性咳嗽，体重不增，少数死亡。支气管病理学改变：早期为急性炎症改变，12天后出现淋巴细胞、浆细胞浸润，继而支气管周围结缔组织增生，27天后显示重度慢性气管炎病变。②大鼠气管腔内黏液阻塞，气管上皮坏死糜烂，杯状细胞增生，气管壁平滑肌增生，肺泡腔扩大，部分融合形成肺大疱。运用这种方法也复制出稳定可靠的动物模型。也可观察到气道和肺组织毒蕈碱型受体(M受体)的数量及功能无改变。

对于细菌感染所致的支气管炎，感染后2天小鼠出现毛松、咳嗽、神萎、食欲缺乏等；3～6天出现气管上皮轻度坏死，杯状细胞数目初期下降，10天后逐渐增加，35天后表现为典型的慢性支气管炎症状，50天后即恢复正常。

气管滴注脂多糖后21天，大鼠出现倦怠、毛发失去光泽，进食、饮水减少等表现，气管与支气管上皮脱落，杯状细胞增生，黏液腺增生肥大，气管、支气管壁见慢性炎症细胞浸润，管壁增厚，管腔充满黏液及大量以中性粒细胞为主的炎症细胞，气管平滑肌增生肥厚。

对于烟雾致大鼠慢性支气管炎而言，随烟雾刺激时间的增加，大鼠气管炎症病损逐渐加重，至第7周形成慢性支气管炎典型变化。其气管炎症细胞的特点是：初期以巨噬细胞为主，随后以淋巴细胞为主，中性粒细胞仅在接触烟雾的早期短时间内出现较高水平。

需确认的信息
1. 模型种属（大鼠还是小鼠或是其他种属）
2. 动物体重有无要求，年龄有无要求
3. 雌雄有无要求
4. 模型构建具体方案
5. 取材要求（采血、取组织样本）