时间:2021-09-29浏览次数:2743
幽门结扎胃酸分泌模型
造模原理
幽门结扎后,胃液滞留胃内,胃酸和胃蛋白酶作用增强;幽门结扎也使胃窦扩张,反射性刺激促胃液素分泌,引起胃酸分泌过多。
造模方法
Wistar大鼠,雌雄兼用,150~225g。禁食12小时(自由饮水)后,口服阿司匹林(200mg/ kg),再禁食18小时并腹腔内注射盐酸lv胺酮(50mg/kg)麻醉动物,进行幽门结扎手术。
术后4小时,处死动物,开腹、夹住食管取出胃,小心收集胃液并记录胃液量,测定胃液总酸度、胃蛋白酶活性和黏蛋白量。测定胃组织匀浆中的脂质过氧化物、内源性超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)。
将胃浸入1%甲醛中10分钟,沿胃大弯剪开胃,观察溃疡点数,计算溃疡指数和溃疡发生率。
结果可见
阿司匹林加幽门结扎组的溃疡发生率为100%,严重的可见到溃疡深达肌层甚至穿孔。与对照组或雷尼替丁组相比,溃疡指数或等级都明显升高,胃液总酸度、胃蛋白酶活性明显升高而黏蛋白量明显降低。脂质过氧化物浓度明显升高而SOD、CAT和GSH水平都明显降低。
组胺胃酸分泌模型
什么是组胺
组胺是自体活性物质之一,在体内由组氨酸脱羧基而成,组织中的组胺是以无活性的结合型存在于肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒中,皮肤、支气管粘膜、肠粘膜和神经系统中含量较多。当机体受到理化刺激或发生过敏反应时,可引起这些细胞脱颗粒,导致组胺释放,与组胺受体结合而产生生物效应。
目的和原理
一种连续记录大鼠胃酸分泌 目的和原理:一种连续记录大鼠胃酸分泌的方法。用于评价抗溃疡药对组胺,乙酰 的方法.用于评价抗溃疡药对组胺,乙酰胆碱,和胃泌素刺激胃酸分泌的抑制作用。 胆碱,和胃泌素刺激胃酸分泌的抑制作用.
造模方法
1.雄性SD大鼠,体重220-250g左右。实验前18h禁食但保持饮水。
2.动物称重,用乌拉坦1.5g/kg进行麻醉,并借助一个热台保持体温恒定。
3.进行气管切开插管,经口插入导管待大鼠.完全麻醉后固定四肢和头部,用内直径2 mm的气管导管插管。剃除颈部鼠毛,用碘伏消毒,75%乙醇脱碘后,纵行剪开颈部皮肤肌层及筋膜,在气管上作“T”型切口后插入气管导管;并用线固定。
4.用6F导管最前端,约7~8厘米用记号笔标记。插管时左手拉紧大鼠舌头,右手持导管(凹面向上,有白色的一端向前), 顺着导管弧度, 紧贴上颚后边一直向前,就可以插进气管。很容易插到食管内.胃导管 端口蠕动泵相连.
5.沿腹中线开腹暴露胃,结扎十二指肠起始端,在胃幽门开口,插入导管并扎紧,经口导管与蠕动泵连接,以37°C生理盐水进行灌流。先以150ml 37°C生理盐水将胃内容物快速冲洗出来,再调整流速1.0ml/min,平衡30min后开始收集胃灌流液。每20分钟收集一个样本,收集前两个样本作为基础.
6.然后通过股静脉用微量注射泵以1.2mI/h的速度恒定输注组胺20μmol/kg/h,组胺给药后2h收集两个样本作为组胺刺激后水平样本,各组动物分别尾静脉注射各组药物,连续180分钟,每20分钟收集一个灌流液样本。
7.所有灌流液样本用0.02M的NaOH进行滴定,以酚酞指示剂变红为滴定终点。将碱式滴定管固定在蝶形铁架台上,倒入碱式滴定液,排除橡胶管和尖嘴内的空气。记录上方液面凹面所在刻度值,将样本倒入50m1锥形瓶内滴入1~2滴酚酞指示剂轻摇混匀,缓慢的捏橡胶管内玻璃珠让碱式滴定液匀速缓慢的滴入锥形瓶内,并在滴入同时不断地轻摇锥形瓶当溶液由无色变成粉色时停止滴定,轻摇两下不褪色(10s不褪色)滴定结束。
实验结果
大鼠的胃酸基础值维持在较低水平3~5μ方程HCL/20min,给予静脉输注给予组胺100分钟后,胃酸分泌量上升至32uEqHCL/20min左右,给予不同剂量的药物后,引起胃酸分泌不同程度的下降。
晶莱生物服务流程
晶莱生物实验服务项目
动物实验 | 细胞生物学 | 病理实验 |
消化系统模型 | 细胞培养 | 病理染色 |
胃酸分泌模型 | 普通细胞株 | HE染色 |
脓毒症模型 | 细胞缺氧培养 | 油红O染色 |
胃溃疡模型 | 细胞培养+支架 | 番红固绿染色 |
胰腺炎模型 | 干细胞培养 | Masson染色 |
肝纤维化模型 | 原代细胞分离/提取/培养 | 天狼猩红染色 |
DIO肥胖模型 | 细胞转染/病毒感染 | PAS糖原染色 |
胆结石模型 | Trans well共培养 | 阿利新蓝染色 |
结肠炎(UC)模型 | 细胞增殖 | 甲苯胺蓝染色 |
脂肪肝模型 | 细胞计数 | 尼氏染色 |
急性肝损伤模型 | 生长曲线测定 | LFB髓鞘染色 |
免疫、代谢系统疾病模型 | 存活曲线测定 | 普鲁士蓝染色 |
骨质疏松模型 | ccK-8增殖检测 | VG染色 |
糖尿病模型 | MTT增殖检测 | EVG染色 |
高尿酸血症模型 | CFSE检测增殖-流式检测 | VonKossa染色 |
呼吸系统模型 | BrDU检测-免疫荧光法 | 刚果红染色 |
肺纤维化模型 | 细胞凋亡 | 苏丹黑B染色 |
慢性肺阻塞模型 | Annexin V/PI流式检测细胞凋亡 | Trap染色 |
急性肺损伤模型 | WB检测凋亡相关蛋白 | 抗酸染色 |
哮喘模型 | 透射电镜观察凋亡小体 | 革兰氏染色 |
肺栓塞模型 | Tunel染色(POD法,DAB显色) | AB-PAS染色 |
支气管炎模型 | Tunel(荧光法,含试剂盒) | 亚甲基蓝染色 |
泌尿生殖系统模型 | DNA ladder法 | 苯胺蓝染色 |
慢性肾衰模型 | 细胞周期 | 荧光 DAPI染色 |
急性肾衰模型 | 细胞显微计数 | 普鲁士蓝染色 |
肾间质纤维化模型 | PI染色 | 间苯二酚碱性品红染色 |
肾结石模型 | BrdU渗入法 | 银染 |
肾炎模型 | 免疫荧光染色 | 黑色素染色 |
子宫内膜异位症模型 | PI流式检测细胞周期 | 镀银染色 |
心血管系统模型 | 细胞运动 | PASM 六胺银染色 |
冠心病模型 | Transwell检测细胞迁移 | VG染色 |
心肌梗死模型 | Transwell检测细胞侵袭 | 富尔根染色 |
心脏骤停模型 | 细胞划痕 | 亚甲基蓝染色 |
慢性心力衰竭模型 | 细胞克隆 | 碘-碘化钾染色 |
动脉粥样硬化模型 | 集落形成法/稀释铺板方法 | Goldner三色法染色 |
白血病模型 | 软琼脂克隆法 | PAS-萘酚磺S染色 |
高血压模型 | 毛细管克隆法 | 改良苯酚品红染色 |
神经系统模型 | 体外实验血管生成 | 网状纤维染色 |
脑卒中模型 | 磁珠分选细胞 | β-半乳糖苷酶染色 |
栓塞性脑梗死模型 | 流式分选细胞 | 镀银染色 |
脑出血模型 | 开机费 | movat五色染色 |
脑损伤模型 | 单色 | 维多利亚蓝染色 |
脊髓损伤模型 | 双色 | 免疫组化 |
帕金森模型 | CBA多细胞因子流式检测 | 免疫组化预式 |
老年痴呆模型 | 组织/血液细胞制备 | 免疫组化正式 |
应激模型 | 组织单细胞制备 | 免疫荧光(石蜡-单标) |
骨骼疾病模型 | 中性粒细胞提取 | 免疫荧光(石蜡-双标) |
骨折模型 | 其他样本细胞制备(如血液等) | 免疫荧光(石蜡-三标) |
骨缺损模型 | 外周血PBMC分离 | 免疫荧光(冰冻-单标) |
风湿免疫性关节炎模型 | 线粒体组学 | 免疫荧光(冰冻-双标) |
骨关节炎模型 | 线粒体膜电位检测-流式法 | 制片前处理 |
五官疾病模型 | 线粒体膜电位检测-免疫荧光法 | 石蜡组织包埋 |
眼科疾病模型 | 线粒体ROS生物含量检测--流式 | 特殊包埋(细胞、材料、眼球等) |
鼻腔疾病模型 | 线粒体ROS生物含量检测--免疫荧光 | 软化(肝硬化、皮肤结痂、植物等) |
皮肤疾病模型 | 线粒体通透性转换孔(mPTP) | 骨组织脱钙(小) |
皮肤损伤模型 | 溶酶体免疫荧光法 | 骨组织脱钙(大) |
肿瘤疾病模型 | 线粒体+溶酶体共定位 | 骨组织EDTA脱钙(小) |
原位瘤模型 | 内质网 | 骨组织EDTA脱钙(大) |
转移瘤模型 | 线粒体钙瞬时变化检测-流式 | 石蜡白片 |
皮下植瘤模型 | ATP检测 | 细胞爬片 |
ADP检测 | ||
AMP检测 | ||
流式 | DNA/RNA半定量检测 | 基因编辑工具 |
组织细胞悬液处理 | pcr检测mRNA | 合成(3保1)片段/质粒/引物合成 |
细胞处理 | microRNA检测 | 质粒载体构建 |
血液标本处理 | LncRNA表达量的检测 | 过表达腺病毒载体构建包装 |
细胞刺激培养 | CirRNA表达量的检测 | shRNA腺病毒载体构建包装 |
单色检测 | 凝胶电泳 | 过表达慢病毒载体构建包装 |
双色检测 | 基因合成 | shRNA慢病毒载体构建包装 |
Annexin V/PI凋亡 | <300 | 过表达腺相关病毒载体构建包装 |
细胞周期 | 300-1,500 | shRNA腺病毒载体构建包装 |
1500 - 5000 | 稳转细胞株 | |
>5000 | ||
特殊序列 | ||
ELISA | WB | qPCR |
组织匀浆处理 | 蛋白提取及定量一 | RNA抽提 |
ELISA(不含试剂盒)48T/kit | WB检测一(10孔膜/指标) | mRNA引物设计及合成 |
ELISA(不含试剂盒)96T/kit | 灰度值分析及作图一(10孔膜/指标) | miRNA引物设计及合成 |
ELISA(含国产试剂盒)48T/kit | 蛋白提取及定量二 | LncRNA引物设计及合成 |
ELISA(含国产试剂盒)96T/kit | WB检测二(10孔膜/指标) | CircRNA引物设计及合成 |
灰度值分析及作图二(10孔膜/指标) | mRNA RT-qPCR | |
miRNA RT-qPCR | ||
LncRNA RT-qPCR | ||
CircRNA RT-qPCR |
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