胃酸分泌模型

时间:2021-09-29浏览次数:1847

幽门结扎胃酸分泌模型

造模原理

幽门结扎后,胃液滞留胃内,胃酸和胃蛋白酶作用增强;幽门结扎也使胃窦扩张,反射性刺激促胃液素分泌,引起胃酸分泌过多。

造模方法
Wistar大鼠,雌雄兼用,150~225g。禁食12小时(自由饮水)后,口服阿司匹林(200mg/ kg),再禁食18小时并腹腔内注射盐酸lv胺酮(50mg/kg)麻醉动物,进行幽门结扎手术。

术后4小时,处死动物,开腹、夹住食管取出胃,小心收集胃液并记录胃液量,测定胃液总酸度、胃蛋白酶活性和黏蛋白量。测定胃组织匀浆中的脂质过氧化物、内源性超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)。

将胃浸入1%甲醛中10分钟,沿胃大弯剪开胃,观察溃疡点数,计算溃疡指数和溃疡发生率。

结果可见
阿司匹林加幽门结扎组的溃疡发生率为100%,严重的可见到溃疡深达肌层甚至穿孔。与对照组或雷尼替丁组相比,溃疡指数或等级都明显升高,胃液总酸度、胃蛋白酶活性明显升高而黏蛋白量明显降低。脂质过氧化物浓度明显升高而SOD、CAT和GSH水平都明显降低。

组胺胃酸分泌模型

什么是组胺
组胺是自体活性物质之一,在体内由组氨酸脱羧基而成,组织中的组胺是以无活性的结合型存在于肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒中,皮肤、支气管粘膜、肠粘膜和神经系统中含量较多。当机体受到理化刺激或发生过敏反应时,可引起这些细胞脱颗粒,导致组胺释放,与组胺受体结合而产生生物效应。

目的和原理
一种连续记录大鼠胃酸分泌 目的和原理:一种连续记录大鼠胃酸分泌的方法。用于评价抗溃疡药对组胺,乙酰 的方法.用于评价抗溃疡药对组胺,乙酰胆碱,和胃泌素刺激胃酸分泌的抑制作用。 胆碱,和胃泌素刺激胃酸分泌的抑制作用.

造模方法
1.雄性SD大鼠,体重220-250g左右。实验前18h禁食但保持饮水。

2.动物称重,用乌拉坦1.5g/kg进行麻醉,并借助一个热台保持体温恒定。

3.进行气管切开插管,经口插入导管待大鼠.完全麻醉后固定四肢和头部,用内直径2 mm的气管导管插管。剃除颈部鼠毛,用碘伏消毒,75%乙醇脱碘后,纵行剪开颈部皮肤肌层及筋膜,在气管上作“T”型切口后插入气管导管;并用线固定。

4.用6F导管最前端,约7~8厘米用记号笔标记。插管时左手拉紧大鼠舌头,右手持导管(凹面向上,有白色的一端向前), 顺着导管弧度, 紧贴上颚后边一直向前,就可以插进气管。很容易插到食管内.胃导管 端口蠕动泵相连.

5.沿腹中线开腹暴露胃,结扎十二指肠起始端,在胃幽门开口,插入导管并扎紧,经口导管与蠕动泵连接,以37°C生理盐水进行灌流。先以150ml 37°C生理盐水将胃内容物快速冲洗出来,再调整流速1.0ml/min,平衡30min后开始收集胃灌流液。每20分钟收集一个样本,收集前两个样本作为基础.

6.然后通过股静脉用微量注射泵以1.2mI/h的速度恒定输注组胺20μmol/kg/h,组胺给药后2h收集两个样本作为组胺刺激后水平样本,各组动物分别尾静脉注射各组药物,连续180分钟,每20分钟收集一个灌流液样本。

7.所有灌流液样本用0.02M的NaOH进行滴定,以酚酞指示剂变红为滴定终点。将碱式滴定管固定在蝶形铁架台上,倒入碱式滴定液,排除橡胶管和尖嘴内的空气。记录上方液面凹面所在刻度值,将样本倒入50m1锥形瓶内滴入1~2滴酚酞指示剂轻摇混匀,缓慢的捏橡胶管内玻璃珠让碱式滴定液匀速缓慢的滴入锥形瓶内,并在滴入同时不断地轻摇锥形瓶当溶液由无色变成粉色时停止滴定,轻摇两下不褪色(10s不褪色)滴定结束。

实验结果
大鼠的胃酸基础值维持在较低水平3~5μ方程HCL/20min,给予静脉输注给予组胺100分钟后,胃酸分泌量上升至32uEqHCL/20min左右,给予不同剂量的药物后,引起胃酸分泌不同程度的下降。

晶莱生物服务流程


晶莱生物实验服务项目

动物实验细胞生物学病理实验
消化系统模型细胞培养病理染色
胃酸分泌模型普通细胞株HE染色
脓毒症模型细胞缺氧培养油红O染色
胃溃疡模型细胞培养+支架番红固绿染色
胰腺炎模型干细胞培养Masson染色
肝纤维化模型原代细胞分离/提取/培养天狼猩红染色
DIO肥胖模型细胞转染/病毒感染PAS糖原染色
胆结石模型Trans well共培养阿利新蓝染色
结肠炎(UC)模型细胞增殖甲苯胺蓝染色
脂肪肝模型细胞计数尼氏染色
急性肝损伤模型生长曲线测定LFB髓鞘染色
免疫、代谢系统疾病模型存活曲线测定普鲁士蓝染色
骨质疏松模型ccK-8增殖检测VG染色
糖尿病模型MTT增殖检测EVG染色
高尿酸血症模型CFSE检测增殖-流式检测VonKossa染色
呼吸系统模型BrDU检测-免疫荧光法刚果红染色
肺纤维化模型细胞凋亡苏丹黑B染色
慢性肺阻塞模型Annexin V/PI流式检测细胞凋亡Trap染色
急性肺损伤模型WB检测凋亡相关蛋白抗酸染色
哮喘模型透射电镜观察凋亡小体革兰氏染色
肺栓塞模型Tunel染色(POD法,DAB显色)AB-PAS染色
支气管炎模型Tunel(荧光法,含试剂盒)亚甲基蓝染色
泌尿生殖系统模型DNA ladder法苯胺蓝染色
慢性肾衰模型细胞周期荧光 DAPI染色
急性肾衰模型细胞显微计数普鲁士蓝染色
肾间质纤维化模型PI染色间苯二酚碱性品红染色
肾结石模型BrdU渗入法银染
肾炎模型免疫荧光染色黑色素染色
子宫内膜异位症模型PI流式检测细胞周期镀银染色
心血管系统模型细胞运动PASM 六胺银染色
冠心病模型Transwell检测细胞迁移VG染色
心肌梗死模型Transwell检测细胞侵袭富尔根染色
心脏骤停模型细胞划痕亚甲基蓝染色
慢性心力衰竭模型细胞克隆碘-碘化钾染色
动脉粥样硬化模型集落形成法/稀释铺板方法Goldner三色法染色
白血病模型软琼脂克隆法PAS-萘酚磺S染色
高血压模型毛细管克隆法改良苯酚品红染色
神经系统模型体外实验血管生成网状纤维染色
脑卒中模型磁珠分选细胞β-半乳糖苷酶染色
栓塞性脑梗死模型流式分选细胞镀银染色
脑出血模型开机费movat五色染色
脑损伤模型单色维多利亚蓝染色
脊髓损伤模型双色免疫组化
帕金森模型CBA多细胞因子流式检测免疫组化预式
老年痴呆模型组织/血液细胞制备免疫组化正式
应激模型组织单细胞制备免疫荧光(石蜡-单标)
骨骼疾病模型中性粒细胞提取免疫荧光(石蜡-双标)
骨折模型其他样本细胞制备(如血液等)免疫荧光(石蜡-三标)
骨缺损模型外周血PBMC分离免疫荧光(冰冻-单标)
风湿免疫性关节炎模型线粒体组学免疫荧光(冰冻-双标)
骨关节炎模型线粒体膜电位检测-流式法制片前处理
五官疾病模型线粒体膜电位检测-免疫荧光法石蜡组织包埋
眼科疾病模型线粒体ROS生物含量检测--流式特殊包埋(细胞、材料、眼球等)
鼻腔疾病模型线粒体ROS生物含量检测--免疫荧光软化(肝硬化、皮肤结痂、植物等)
皮肤疾病模型线粒体通透性转换孔(mPTP)骨组织脱钙(小)
皮肤损伤模型溶酶体免疫荧光法骨组织脱钙(大)
肿瘤疾病模型线粒体+溶酶体共定位骨组织EDTA脱钙(小)
原位瘤模型内质网骨组织EDTA脱钙(大)
转移瘤模型线粒体钙瞬时变化检测-流式石蜡白片
皮下植瘤模型ATP检测细胞爬片

ADP检测

AMP检测



流式DNA/RNA半定量检测基因编辑工具
组织细胞悬液处理pcr检测mRNA合成(3保1)片段/质粒/引物合成
细胞处理microRNA检测质粒载体构建
血液标本处理LncRNA表达量的检测过表达腺病毒载体构建包装
细胞刺激培养CirRNA表达量的检测shRNA腺病毒载体构建包装
单色检测凝胶电泳过表达慢病毒载体构建包装
双色检测基因合成shRNA慢病毒载体构建包装
Annexin V/PI凋亡<300过表达腺相关病毒载体构建包装
细胞周期300-1,500shRNA腺病毒载体构建包装

1500 - 5000稳转细胞株

>5000

特殊序列



ELISAWBqPCR
组织匀浆处理蛋白提取及定量一RNA抽提
ELISA(不含试剂盒)48T/kitWB检测一(10孔膜/指标)mRNA引物设计及合成
ELISA(不含试剂盒)96T/kit灰度值分析及作图一(10孔膜/指标)miRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)48T/kit蛋白提取及定量二LncRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)96T/kitWB检测二(10孔膜/指标)CircRNA引物设计及合成

灰度值分析及作图二(10孔膜/指标)mRNA RT-qPCR


miRNA RT-qPCR


LncRNA RT-qPCR


CircRNA RT-qPCR



收费标准/服务周期/提供结果:
欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
更多实验技术服务请浏览网站其他内容,或来电咨询!

做实验,找晶莱!您的科研生涯,我们一路相伴!
【平台项目开展范围】慢病毒,腺病毒,RNAi类,分子生物实验,病理实验,免疫学实验,细胞实验,动物实验,蛋白组学实验,芯片类实验,并为广大客户朋友们提供课题设计指导、基金申请指导等服务。


上一篇:大肠癌动物模型

下一篇:胃溃疡模型