大鼠肾小管导管上皮细胞-NRK-52E

NRK-52E细胞的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。有以下几点需要注意：

    （1）冻存前细胞状态，细胞最好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；
    （2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好；
    （3）NRK-52E细胞消化和吹打，切忌胰酶消化过度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。
    （4）离心后加入冻存液，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。
    （5）关于“慢冻”，传统的方法，NRK-52E细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。、