【五分钟讲实验】肝癌动物模型构建方法详解及案例分析！

肝癌（liver cancer）即肝脏恶性肿瘤，可分为原发性和继发性两大类。原发性肝脏恶性肿瘤起源于肝脏的上皮或间叶组织，前者称为原发性肝癌，是高发的，危害极大的恶性肿瘤；后者称为肉瘤，与原发性肝癌相比较较为少见。继发性或称转移性肝癌系指全身多个器官起源的恶性肿瘤侵犯至肝脏。

一般多见于胃、胆道、胰腺、结直肠、卵巢、子宫、肺、乳腺等器官恶性肿瘤的肝转移。原发性肝癌的病因及确切分子机制尚不完全清楚。

1. 实验材料

① 实验动物：Balb/c nude （雌性，5周龄）；

② 细胞：Hepg2；

③ 器械：一次性注射器、酒精棉球。

①检查培养的Hepg2细胞的形态和增殖情况。当细胞达到足够数量并保持活跃状态时，可以进行接种前的准备工作。洗涤细胞以去除培养基中的残留物，使用细胞计数仪检查细胞的数量和活力。 

②当细胞活性在90%以上，数量达到5*10^6时，使用PBS或无血清培养基重悬，放置在含碎冰的泡沫盒中，保持活性，等待接种。 

③混匀细胞，混细胞时缓慢轻柔，尽量不要出现气泡；准备一个湿棉球和一个半干棉球，调整注射器针头剖面与刻度的位置，缓慢抽入计算好体积的细胞（排气泡时动作要轻柔），用半干棉球擦拭注射器针头；左手保定小鼠，暴露待接种的部位，并用湿棉球擦拭消毒；右手持注射器，剖面向上进针刺入小鼠皮下，进针长度约为针头的1/3，随后小幅度摆动注射器针头，钝性分离皮下的结缔组织，右手拇指缓慢推入计算好的细胞体积，这时，接种部位会出现圆形隆起，停顿两秒，旋转针头使剖面向下顺势拔出针头。每接种完一笼小鼠需要更换注射器，更换棉球，对双手以及工作台面擦拭消毒。 

④在接种后，定期监测动物的健康状况和肿瘤生长情况。记录肿瘤的体积、生长速度和其他相关参数，以便后续研究和分析。