【五分钟讲实验】取血方式和麻醉剂选择对动物生化检测指标的影响分析

在进行动物血生化检测时需要注意饮食、采集、血样处理、检测方法和数据处理等方面。只有在严格遵守相关规范和伦理要求的情况下，才能保证实验结果的可靠性和科学性。

大鼠是常用的实验动物之一，许多实验需对其血液中相关指标进行分析检测，血液采集的质量和数量直接影响实验结果。

以需要血液样本量大时的两种常用取血方法举例：戊巴比妥钠麻醉后腹主静脉取血和断头取血

1. 糖、脂肪、蛋白代谢指标：

两种取血方法对中糖(GLU)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)和尿酸(UA)含量有明显差异；

甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)变化不明显。

2. 肝肾功能指标：

两种取血方法对谷丙转氨酶(GOT)和谷草转氨酶(GPT)活性影响较大；

对肾功能指标中的尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)影响不明显。

3. 能量代谢指标：

两种取血方法对能量代谢指标中的乳酸(LAC)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同工酶(CKMB)含量均有明显影响。

综上，取血方法不同，血液生化很多指标都出现差异。

4. 影响因素分析：

①麻醉药物的影响: 

不同麻醉药物可不同程度的引起大鼠静脉血血气、电解质及能量代谢产物的改变。

戊巴比妥钠作为麻醉剂，应用广泛。SD 大鼠用戊巴比妥钠麻醉后，随时间延长，体内肝肾功能、糖代谢与脂类代谢均发生变化。

②应激反应的影响: 

越来越多的证据表明，在动物实验过程中，常规的实验处置手段能够引起动物的应激反应，会引起血液生化指标的改变，这也可能是造成取血方法生化指标差异的原因之一。

③血液质量的影响: 

麻醉取血时得到的血液样本是静脉血，而断头取血时，多为动静脉混合血，还往往会混入淋巴液、动物的毛发等，很容易导致溶血，对一些指标造成影响。

在动物实验过程中，取血方法会对很多临床常用指标产生影响，因此在选用取血方式时要充分考虑到麻醉药物、动物应激反应、血液质量等影响因素。

在进行与糖( GLU) 、总蛋白( TP) 、白蛋白( ALB) 、尿酸( UA) 、谷丙转氨酶( GOT) 、谷草转氨酶( GPT) 、乳酸( LAC) 、乳酸脱氢酶( LDH) 、肌酸激酶( CK) 、肌酸激酶同工酶( CKMB) 、皮质醇( COR) 指标相关的实验时应注意取血方法对血液生化指标的影响。

以常用的注射类麻醉剂戊巴比妥钠、水合氯醛、氨基甲酸乙酯为例，对雄性 SD 大鼠血液学指标的影响进行分析。

1. 血液生化指标：

3种麻醉药物对大鼠总蛋白（TP）、丙氨酸转移酶（ALB）、肌酸激酶（CK）有显著影响；

戊巴比妥钠和氨基甲酸乙酯对白蛋白（ALT）有所影响；

水合氯醛和氨基甲酸乙酯可使SD大鼠血糖（GLU）显著升高。

提示：

在进行与总蛋白（TP）、丙氨酸转移酶（ALB）、肌酸激酶（CK）、白蛋白（ALT）、血糖（GLU）指标相关的实验时应注意麻醉剂对血液生化指标的影响。

2. 血液细胞学指标：

3种麻醉药导致大鼠平均红细胞体积（MCV）显著变化；

戊巴比妥钠对大鼠平均血红蛋白量（MCH）、淋巴细胞百分数（LYMPH％）、中性粒细胞百分数（NEUT％）有显著影响；

水合氯醛对大鼠红细胞分布宽度（RDW-SD）会产生影响；

氨基甲酸乙酯却对11项血液细胞指标均有显著的影响。

3. 影响因素分析

① 氨基甲酸乙酯

氨基甲酸乙酯对雄性大鼠的血液学指标影响显著。由于其本身具有致癌性，而且有实验证实氨基甲酸乙酯直接注入血中有溶血作用。因此在实验动物的全身麻醉中不推荐使用此药物。

② 水合氯醛

水合氯醛可使空腹 SD 大鼠血糖（GLU）显著升高，可能影响糖尿病动物实验中实验结果的准确性。

③ 戊巴比妥钠

戊巴比妥钠对 SD 大鼠总蛋白（TP）、丙氨酸转移酶（ALB）、肌酸激酶（CK）、平均血红蛋白量（MCH）、淋巴细胞百分数（LYMPH％）、中性粒细胞百分数（NEUT％）指标有影响。

综上所述，选择麻醉药物和麻醉方法时，在满足手术要求和保证动物安全的前提下，应考虑麻醉药物对观察指标和结果的影响。当麻醉的影响不可避免时，应了解和控制影响的程度和范围。并提供校正和分析实验结果的资料。