RACE
实验意义
1. 该方法基于PCR技术,步骤简单、耗时短、经济节省,便于广泛应用到基因克隆和基因表达研究上。
2. 该方法在相关科学研究工作和肿瘤、遗传性疾病等病理诊断及临床治疗研究上有着重要的应用意义。
3. 对于低丰度基因的克隆优势明显。
实验原理及步骤
1. 设计引物并合成引物:根据RACE技术引物设计原则设计引物;
2. cDNA第一链的合成;
3. cDNA第二链的合成;
4. RACE-PCR循环扩增;
5. RACE产物的验证。
结果展示
实验完成周期及交付标准
1. 实验周期:1个月左右
2. 交付标准:琼脂糖凝胶电泳图、纯化的目的片段、实验报告(试剂、耗材、实验步骤)、原始数据
需确认的信息
1. 目的基因及种属
2. 基因序列信息
参考文献
[1] Bower N I , Johnston I A . Targeted rapid amplification of cDNA ends (T-RACE)--an improved RACE reaction through degradation of non-target sequences[J]. Nucleic Acids Research, 2010, 38(21):e194-e194.
[2] Yeku O , Frohman M A . Rapid amplification of cDNA ends (RACE).[J]. Methods in Molecular Biology, 2003, 226(67):105.
[3] Perera B P U , Kim J . Next-generation sequencing-based 5′ rapid amplification of cDNA ends for alternative promoters[J]. Analytical Biochemistry, 2016, 494:82-84.
汇聚科研工匠·引领医学转化