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RACE

实验意义

1. 该方法基于PCR技术,步骤简单、耗时短、经济节省,便于广泛应用到基因克隆和基因表达研究上。

2. 该方法在相关科学研究工作和肿瘤、遗传性疾病等病理诊断及临床治疗研究上有着重要的应用意义。

3. 对于低丰度基因的克隆优势明显。


实验原理及步骤

1. 设计引物并合成引物:根据RACE技术引物设计原则设计引物;

2. cDNA第一链的合成;

3. cDNA第二链的合成;

4. RACE-PCR循环扩增;

5. RACE产物的验证。


结果展示

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实验完成周期及交付标准

1. 实验周期:1个月左右

2. 交付标准:琼脂糖凝胶电泳图、纯化的目的片段、实验报告(试剂、耗材、实验步骤)、原始数据

 

需确认的信息

1. 目的基因及种属

2. 基因序列信息

 

参考文献

[1] Bower N I , Johnston I A . Targeted rapid amplification of cDNA ends (T-RACE)--an improved RACE reaction through degradation of non-target sequences[J]. Nucleic Acids Research, 2010, 38(21):e194-e194.

[2] Yeku O , Frohman M A . Rapid amplification of cDNA ends (RACE).[J]. Methods in Molecular Biology, 2003, 226(67):105.

[3] Perera B P U , Kim J . Next-generation sequencing-based 5′ rapid amplification of cDNA ends for alternative promoters[J]. Analytical Biochemistry, 2016, 494:82-84.


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