外泌体

时间:2018-12-20浏览次数:921

外泌体

外泌体是多泡体限制性膜与细胞质膜融合而释放的脂质双层膜囊泡,直径约30~200 nm,电子显微镜下呈双凹碟形或杯状,外泌体能够运载其内源性的蛋白质、脂质、核酸、miRNA等信息物质参与细胞间通讯和机体的生理代谢过程,被认为是细胞间通讯、疾病诊断和预后循环生物标志物的重要载体,在临床诊断和治疗方面展现出了极具前景的研究价值。外泌体通过其携带的蛋白质、核酸、脂类等来调节受体细胞的生物学活性,从而参与机体免疫应答、抗原提呈、细胞迁移、细胞分化、肿瘤侵袭等生物学过程。

 

外泌体的负富集分离

外泌体在大小、来源和分子内容物方面均存在高度异质性,因此富集分离外泌体是开展其基础研究和临床转化应用的前提。传统经典的富集分离外泌体的方法有:超速离心、密度梯度离心、共沉淀等技术手段。

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外泌体鉴定

WB/ELISA检测膜蛋白:CD9、CD63、CD81,Alix, TSG101, annexins, Rabs等

透射电镜:形态学鉴定, 双层囊膜结构是外泌体重要标志之一。

Nanosight粒径密度分布分析:外泌体特征粒径大多数处于100nm左右。


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外泌体显微成像. a) SEM;b) TEM; c) cryo-EM; d) AFM

from Shao, H., et al. 2018. Chem Rev.


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WB和ELISA鉴定外泌体蛋白. a) WB; b)  ELISA

from Shao, H., et al. 2018. Chem Rev.


需确认的信息

1. 样本类型及种属

2. 样本数量

3. 需鉴定方式(WB、ELISA、TEM)

 

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