脑梗MCAO(含再灌注)

时间:2020-12-25浏览次数:159

       脑缺血在临床上具有较高的发病率和死亡率,严重危害中老年患者健康,寻找有明确疗效且作用机制清晰的预防和治疗脑梗死的药物是当前研究的前沿课题和热点领域。因此,脑缺血动物模型的制备在科学研究中具有重要意义。


MCAO 模型制备:

      术前准备见左图,选择 220-250g 的 SD 大鼠,10% 水合氯醛(300uL/100g)麻醉保定,仰卧位,颈部正中剃毛消毒备用(右图)



        剪开颈部皮肤,钝性分离颈部肌肉,暴露并游离单侧颈动脉,穿线备用。


        动脉夹暂时夹闭主动脉,并结扎颈外动脉。主动脉用注射器针头挑开小口,插入自制线栓到颈内动脉,大约 2.5-3cm。结扎颈内动脉,结扎主动脉近心端,松开动脉夹。


       逐层缝合,根据实验的需要的缺血时间进行拔栓手术(再灌注),拔栓时动物要完全麻醉,把出线栓的长度约为 0.5cm。


模型成功的评判方法

        神经功能缺损(NDS)评分
        0 分:活动基本正常,无明显神经病学症状;
        1 分:左侧前爪无法完全伸展;
        2 分:爬行时向左侧转圈;
        3 分:行走时向偏瘫侧倾倒;
        4 分:不能自动行走,有意识障碍
        5 分:死亡


水迷宫实验

       Morris 水迷宫(Morris water maze, MWM)实验是一种强迫实验动物(大鼠、小鼠)游泳,学习寻找隐藏在水中平台的一种实验,主要用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力。(左图正常,右图模型)


TTC 染色

        TTC 染色是常用来评价脑缺血损伤的指标,缺血区域会呈白色。


image.png

HE 染色

      一般发生缺血损伤的脑组织的神经元细胞会受到明显损伤(上侧正常,下侧损伤)


TUNEL 染色

           发生损伤的脑组织,TUNEL 染色的细胞会明显增多。