【五分钟讲实验】牙周炎动物模型造模方法及模型评价详解！

2. 常用牙周炎造模方法

3. 结扎法

① 实验动物：SD 大鼠。

② 实验材料：显微外科手术器械、正畸结扎丝。

③ 实验过程：

a. 大鼠麻醉后采用直径为0.2 mm的正畸结扎丝结扎大鼠双侧上领第一磨牙。 

b. 结扎丝在大鼠上领双侧第一磨牙远中侧进入，环上领第一恒磨牙一周后，用针持在腾侧结扎固定，置于龈下，并保证结扎丝不脱落。 

c. 术后待大鼠全部苏醒，即可喂食常规鼠料和水。4周后进行组织学观察，确定建模是否成功

④ 注意事项:

结扎材料有尼龙线、细丝线、橡皮圈、正畸用钢丝等，其中正畸不锈钢丝结扎的效果最好，成功率更高。 l在建模过程中要定期检查结扎材料是否脱落，或根据需要进行更换。 l此方法在结扎时可拨离牙颈处包裹的牙周组织，从而造成轻微的机械性损伤。

⑤ 优点：成本较低、操作简单、疾病开始时间明确、结果可预测，为目前建立牙周炎模型首选的方法

⑥ 缺点：引起的是急性牙周炎病变，与人牙周炎病变过程不同；结扎过程可能造成牙周组织创伤。

4. 接种牙周致病菌法

① 实验动物：6周龄SD大鼠。

② 实验材料：牙龈卟啉单胞菌、卡那霉素或安苄素。 

③ 实验方法

a. 实验前4天，按20mg/只的剂量经大鼠肌肉注射卡那霉素或安苄素, 1次/d，以便抑制不利于牙龈卟啉菌定居生长的内源性细菌； 

b. 给予抗生素3天后，取50g/L的低黏性碳氧甲基纤维素牙龈卟啉菌悬液，经管饲使细菌涂于龈缘乃至整个口腔，每天一次连续三天。 

c. 6周至4月左右，可出现牙龈红肿以及牙槽骨吸收，尤其是在磨牙的邻接面位置，表明牙周炎造模成功。

④ 接种菌类

牙周致病菌主要有牙龈卟啉单胞菌、伴放线聚集杆菌、具核梭杆菌、中间普氏菌、福赛坦氏菌、齿垢密螺旋体等。牙龈卟啉单胞菌已被确定为主要的牙周病原体之一，是最常用于牙周炎模型建立的牙周致病菌。

⑤ 优点：造模方法简单，单菌就能诱导牙周炎的发生，多菌引起的感染更严重。 

⑥ 缺点：造模周期较长，但单独使用可能比接种细菌联合结扎的方法效果略差。

5. 注射脂多糖法

① 实验动物：6-8周龄SD大鼠。

② 实验材料：LPS（LPS是革兰阴性菌细胞壁外膜中的成分，是革兰阴性菌具有的一种致病物质，具有很高的毒性和抗原性。LPS可以进入牙周组织导致炎症和牙槽骨吸收）。

③ 实验方法：

a. 大鼠麻醉后，在第1和第2磨牙之间颊侧自龈沟注射LPS 0.1mL，2mg/mL，3次/周。

b. 注射3周后，牙槽骨轻微吸收，5周时牙槽骨吸收明显，建立模型速度与人类牙周炎相近，更接近人类牙周炎发病状态。

④ 优点：LPS建立牙周炎模型优点是实验可控性好、节省时间、具有可重复性。

⑤ 缺点：不足之处是LPS纯化过程较复杂，而且LPS生物化学功能不稳定。

6. 高糖黏性食料喂饲法

① 实验动物：稻鼠。

② 实验材料：高糖饲料 

③ 实验方法：

a. 从实验当天起喂食糖水和高糖饲料饮食喂养。约22周时高蔗糖饮食组稻鼠牙周袋深度、牙槽骨高度等临床指标均比标准饮食组差。

b. 高糖黏性饮食不利于牙齿的自洁，为鼠类口腔中细菌生长、繁殖提供了较有利环境。

④ 优点：是避免了结扎等造成的鼠牙周组织机械损伤，

⑤ 缺点：只适用于仓鼠、稻鼠这类牙根之间分叉较小，对牙周炎较敏感的鼠类。