【五分钟讲模型】呼吸系统动物模型——咳嗽动物模型

呼吸系统主要疾病动物模型分为以下8类：

咳嗽动物模型、支气管哮喘动物模型、慢性支气管炎模型

肺气肿和肺心病动物模型、肺水肿动物模型、肺纤维化动物模型

肺结核病动物模型、肺硅沉着症动物模型

1. 小鼠氨水引咳法

1.1造模原理

浓氨水是一种较强的化学刺激物，动物吸入氨水气雾后，刺激呼吸道感受器，引起咳嗽。

1.2 动物和主要器材

成年小鼠,性别不拘。500ml玻璃罩; 空气压缩机(或脚踏风箱)。

1.3 操作步骤

①小鼠置玻璃罩内→空气压缩机以400mmHg恒压将氨水喷入罩内→喷雾5s→记录动物咳嗽潜伏期和2min内咳嗽次数。也可用引起一半小鼠咳嗽的喷雾时间(FDT50)为指标。

②观察药物的止咳作用  小鼠按体重均分3组，每组至少15只小鼠。给药组灌服受试药，模型组灌服等体积生理盐水，阳性对照药组腹腔注射磷酸可待因30mg/kg体重。灌胃给予受试药1 h后、腹腔注射给予受试药30min后开始喷雾。喷雾一定时间，终止喷雾，观察咳嗽反应。

1.4 模型评价与注意事项

① 氨水诱发小鼠咳嗽反应变异性较大,可在初筛止咳药时应用。

② 咳嗽潜伏期是指从喷入氨水开始至发生咳嗽所需的时间(秒数)。小鼠咳嗽以腹肌收缩(缩胸)，同时张大嘴为准，有时可有咳嗽声，观察必须仔细，也可用听诊。

③ 避免腹腔注射给予受试药,以免干扰动物的咳嗽反应。器听咳嗽声。

2. 小鼠二氧化硫引咳法

2.1 造模原理

二氧化硫是一种强的化学刺激物质,动物吸入其气雾后刺激呼吸道感受器,反射性引起咳嗽。无水亚硫酸钠与硫酸反应生成SO2。

2.2 操作步骤

用一带侧口的三角烧瓶,侧口通过橡皮管与球囊连接,烧瓶内盛有无水亚硫酸钠,烧瓶塞上装一滴定管,内灌硫酸，打开滴定管的活塞使硫酸滴到亚硫酸钠上，在烧瓶内产生SO2气体，气体储存于球囊内，用血管钳夹紧，应用时用注射器吸取4~10ml，注入放置实验小鼠的广口瓶内。

2.3 观察药物的止咳作用 

小鼠按体重均分3组，给药组灌胃给予受试药，模型组灌胃给予等体积生理盐水，阳性对照药组腹腔注射磷酸可待因30 mg/kg体重。灌胃给予受试药1 h或腹腔注射给药30 min后，将小鼠置于充满SO2的烧杯内，观察咳嗽潜伏期，按下式计算药物止咳率：

2.4 注意事项

① 烧杯内SO2的浓度要求在1:50000，该浓度足以引起咳嗽，如浓度过高(如1:10000)易造成动物中毒死亡。

② 实验中SO2产生的多少与实验室温度、无水亚硫酸钠的量关系密切，故无水亚硫酸钠的称量应准确。

③ SO2引咳的个体差异较大,实验时应尽量减少各方面误差。

3.豚鼠枸橼酸引咳法

3.1 造模原理

豚鼠吸入枸橼酸溶液喷雾后，刺激呼吸道粘膜感受器，反射性引起咳嗽。

3.2 动物和主要器材

体重200~250g豚鼠。2~4L玻璃罩; 空气压缩机。

3.3 操作步骤

① 将豚鼠置于玻璃干燥器内,用超声雾化器喷入17.5%枸橼酸雾化气5~10s，观察、记录豚鼠咳嗽潜伏期或记录5min内豚鼠的咳嗽次数。

② 观察药物的止咳作用  将豚鼠按体重随机分为3组,给药组灌胃给予受试药,模型组灌胃给予等体积生理盐水,阳性对照药组腹腔注射磷酸可待因5mg/kg体重。灌胃给予受试药1 h或腹腔注射给药30min后，按上述方法引咳,评受试药的止咳效果。

3.4 模型评价与注意事项

① 豚鼠对化学性刺激物很敏感,刺激后能诱发咳嗽,动物容易得到。二氧化硫引咳法、氨水引咳法和枸橼酸引咳法是研究止咳药的三种常用方法，前二者系用小鼠，费用较低廉，适合于研究止咳药效果的初筛，确定效果后，再用豚鼠作进一步研究。

② 豚鼠的咳嗽声响亮，应以能听到声音为咳嗽。

③ 实验前1日豚鼠应预先挑选，喷雾后5 min内咳嗽次数少于10次者应予以淘汰。

下期我们将全面的讲解呼吸系统疾病模型——支气管哮喘动物模型&慢性支气管炎模型各类模型造模方法、原理、操作过程及注意事项。