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细胞数量

细胞数量:是细胞培养中一项最为基础的指征。


实验意义

在细胞生物学和分子生物学的实验中,细胞实验通常要进行细胞数量的检测,调整细胞至最适合密度,才可进行后续的实验操作(如传代、转染和流式细胞术等),很多实验要对细胞数量进行统计学分析也需要对细胞进行计数操作。


实验步骤

1. 通过软件对显微镜照片进行细胞计数,或者通过细胞计数仪全自动进行计数;

2. 可根据需要对需计数的细胞进行染色,主要有三种染色方法;

3. 台盼蓝染色法:台盼蓝染液可用于检测具有完整细胞膜的正常活细胞,染色后可拍照后计数或直接计数仪计数即可对细胞存活率进行比较精确的定量。

4. PI(碘化丙啶)染色:PI可对细胞核的DNA进行染色,经常用于检测细胞凋亡,染色后进行细胞计数。

5. Hoehest33342是一种穿透细胞膜的蓝色荧光染料,常用来检测细胞凋亡也可用于细胞核染色或常规DNA染色,染色后可通过荧光显微镜、流式细胞仪和细胞计数仪进行检测。


结果展示

1. 台盼蓝法[1]

台盘蓝.png

2. PI染色法[2]

PT染色法.png




实验完成周期及交付标准

1. 实验周期:1-3天

2. 交付标准:细胞计数结果、染色图片、实验报告(实验步骤、试剂、仪器等)


需确认的信息 

1. 细胞类型及种属

2. 细胞分组

3.细胞处理方式


文献参考

[1] Crowley L. C., Marfell B. J., Christensen M. E., et al. Measuring Cell Death by Trypan Blue Uptake and Light Microscopy [J]. 2016, 2016(7): pdb.prot087155.

[2] Niu J., Li C., Wu H., et al. Propidium iodide (PI) stains Nissl bodies and may serve as a quick marker for total neuronal cell count [J]. Acta Histochemica, 2015, 117(2): 182-7.

[3] Chen M., Wang J., Yao S. F., et al. Effect of YAP Inhibition on Human Leukemia HL-60 Cells [J]. International Journal of Medical Sciences, 2017, 14(9): 902-10.

 

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